实体组织分离法其种菇的标准与孢子分离法基本相同，分离前要准备好解剖刀、接种针、斜面试管培养基。分离时见蒸气接种法；或把切去部分菇柄的种菇置于超净工台内或接种箱内，用75%的酒精进行表面消毒，然后用双手在菌盖的一侧纵向撕开，用经75%酒精和火焰灭菌的小镊子夹取一小块菌肉，接入到斜面试管培养基上，于25~27℃培养2~4天后，就可看到组织块上长出的白色绒毛状菌丝，即子实体组织分离培养的菌丝。